1 試驗(yàn)方法
1.1 儀器與試材
安捷倫氣相色譜儀；氮吹濃縮儀MTN-2800D；K-50B 超聲儀；濃縮儀 B-490（瑞士 BUCHI 公司 )；R-5200 離心機(jī)；T-18 渦旋儀（德國(guó) IKA 公司）；Talboys 數(shù)顯型旋渦混合器（美國(guó) Troemner 公司）。五氯硝基苯、六氯苯、林丹、p,p′-DDE、p,p′-DDD、o,p′-DDT、p,p′-DDT標(biāo)準(zhǔn)樣品購(gòu)自農(nóng)業(yè)部天津環(huán)境監(jiān)測(cè)所，濃度為 100 mg/L；正己烷、乙酸乙酯、濃硫酸、氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉等試劑均為分析純；樣品提取液為正己烷與乙酸乙酯的混合溶劑，其體積配比為V ( 正己烷）:V( 乙酸乙酯）= 1:1。蜂花粉樣品購(gòu)置于超市。
1.2 色譜條件
VF-1彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）; 載氣：高純N2，流速為 1.0 mL/min（恒流模式）；尾吹氣：高純N2，流速為 28 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL（不分流）；進(jìn)樣口溫度：280°C；檢測(cè)器溫度 300°C，程序升溫：初始溫度 80°C，保持1 min，以 30°C /min 升至 200°C，保持 1 min，再以10°C /min 升至 280°C保持 6 min。
在以上設(shè)定的色譜條件下，注入標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液和待測(cè)的樣品液進(jìn)行測(cè)定，以滯留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖見(jiàn)圖 1。
1.3 檢測(cè)方法
稱(chēng)取干燥蜂花粉樣品 2g（到0.001g），置于 100 mL離心管中，加 15 mL 水和 30 mL 樣品提取液，用渦旋器渦旋3 min，再用勻漿機(jī)勻漿 2 min，并用少量提取液清洗勻漿機(jī)刀頭，合并提取液，以離心機(jī)在7000 r/min 下離心 5 min，取上清液置于 250 mL平底燒瓶中；沉淀用 30 mL 提取液重復(fù)提取一次。合并上清液于平底燒瓶中濃縮近干，用正己烷溶解并轉(zhuǎn)移定容到 5 mL 刻度試管，再加 2 mL 濃硫酸混勻磺化，以離心機(jī)于2000 r/min 下離心 3 min，取上清液用正己烷定容至 5 mL，并轉(zhuǎn)移到 10 mL 離心管，再加 5mL 5% 氯化鈉水溶液水洗。水洗后，將上清液轉(zhuǎn)移到裝有 1 g 無(wú)水硫酸鈉的 10 mL 離心管中洗脫水分，zui后裝入小瓶，待測(cè)。
2 結(jié)果與討論
2.1 提取溶液的優(yōu)化
實(shí)驗(yàn)比較了V（正己烷）:V（乙酸乙酯）=98:2、V（正己烷）:V（乙酸乙酯）=95:5、V（正己烷）:V（丙酮）=95:5、V（正己烷）:V（乙酸乙酯）=1:1等不同溶劑配比提取液的提取效果。結(jié)果表明：V（正己烷）:V（乙酸乙酯）=1:1配比的提取液提取效果，提取出的干擾雜質(zhì)較少，并且在凈化處理中容易被除去。
2.2 凈化方式選擇
實(shí)驗(yàn)了將蜂花粉中提取的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，以Fllorisil小柱凈化，并以正己烷與乙酸乙酯兩種溶劑不同配比的溶液進(jìn)行洗脫。結(jié)果表明，以V（正己烷）:V（乙酸乙酯）= 98:2 的溶液洗脫效果較好，15mL 該溶液可以*把樣品洗脫。
實(shí)驗(yàn)表明，從茶花蜂花粉、油菜花蜂花粉中提取的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，通過(guò) Fllorisil柱凈化后，油菜花蜂花粉雜質(zhì)組份基本去除，茶花蜂花粉仍然存在較多的雜質(zhì)組份，出現(xiàn)的干擾峰影響了測(cè)定的準(zhǔn)確性，不能適用蜂花粉的檢測(cè)（見(jiàn)圖 2）。
同樣取茶花蜂花粉、油菜花蜂花粉中提取的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，雜質(zhì)組份通過(guò)濃硫酸磺化并離心后，大多沉淀于離心管底部，凈化后的殘留雜質(zhì)與待測(cè)農(nóng)藥能*分離，對(duì)分析測(cè)定沒(méi)有影響（見(jiàn)圖 3）。
2.3 線(xiàn)性范圍及檢出限
用正己烷配置成0.1 mg/L 7種有機(jī)氯農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，再稀釋成 0.002、0.004、0.008、0.01、0.02、0.05 mg/L的系列混合標(biāo)準(zhǔn)梯度溶液，按 1.3色譜條件進(jìn)樣分析，將所得結(jié)果分別制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，或求得回歸方程。
7種有機(jī)氯農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程、線(xiàn)性關(guān)系、線(xiàn)性范圍及檢出限見(jiàn)表1。由表可見(jiàn)，本方法具有較好的檢測(cè)靈敏度，7種有機(jī)氯農(nóng)藥的檢出限為 0.018 ～ 0.080μg/L；并在濃度范圍2～50 μg/L 范圍內(nèi)，均有良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)達(dá)0.994 ～ 0.999。
*：Y- 有機(jī)氯農(nóng)藥峰面積，ρ- 有機(jī)氯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位 μg/L。
2.4 加標(biāo)回收率
準(zhǔn)確稱(chēng)取蜂花粉樣品 10 份，取其中一份作為空白樣，其余分別加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液（3 個(gè)添加水平，每個(gè)添加水平3份），按1.2和1.3方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表 2。試驗(yàn)結(jié)果表明，7 種持久性有機(jī)污染物的添加回收率為 88.8% ～ 108%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2% ～ 9.1%，本方法的準(zhǔn)確度和精密度均能滿(mǎn)足農(nóng)藥多殘留測(cè)定技術(shù)的要求。
3 結(jié)論
本文建立了蜂花粉中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的濃硫酸磺化——毛細(xì)管氣相色譜分析方法，該方法在2～50 μg/L 具有良好的線(xiàn)性 , 7 種持久性有機(jī)氯農(nóng)藥的添加回收率為88.8% ～ 108% ，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2% ～ 9.1%。該方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度均符合農(nóng)藥多殘留測(cè)定技術(shù)的要求。比較了蜂花粉在硫酸磺化法和固相萃取法 2 種不同的前處理方法。綜合各方面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，硫酸磺化法是針對(duì)蜂花粉前處理zui有效并且快捷的方法，其耗時(shí)短 , 溶劑用量少 , 提取出的雜質(zhì)少 , 回收率和重復(fù)性都能滿(mǎn)足分析測(cè)定的要求。
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